细胞凋亡的形态：生化性质实验
最新修订时间：
简介
当程序性细胞死亡（PCD)或凋亡被认识到是多细胞生物体内生长和体内平衡的一个重要调控元件时，用于定量细胞凋亡及区别细胞凋亡和坏死的方法得到了发展。决定一细胞死亡是由于凋亡而不是坏死的标准的最好依据是：①细胞膜和质的变化；②细胞的染色质变化，这两者的发生先于膜的裂解。来源：《精编分子生物学实验指南》第五版
来源：丁香实验
操作方法
1a)将10〜20μL的台盼蓝放至12 mm×75 mm的玻璃试管的底部。加入等量的混合很 好的细胞悬浮液，轻动手腕轻柔地混合。2a)将10μL的混合液加入一标准血细胞计数器的凹槽里。用一明场显微镜的40×〜60 ×的干物镜检查。3a)计数至少200个细胞，记录正常和凋亡或死亡细胞的数量。早期凋亡时细胞由于台盼蓝的排斥呈现白色，但它们将会有不规则的形状或缩拢的核。4a)计算凋亡细胞的百分比（凋亡指
吖啶橙染色1b)将1μL的染色混合液放至12 mm×75 mm的玻璃试管的底部。加入25μL细胞悬浮液，转动手腕轻柔地混合。2b)将10μL的该混合液放在一干净的显微镜载玻片上，盖上22 mm2的盖玻片。用一 落射光显微镜的40×到60×的干物镜和一适合观察荧光素的滤光片结合起来检查。3b)计数至少200个细胞，记录正常和凋亡的细胞核的数量。活的和死亡的非凋亡的细胞核呈现荧光绿色，而且有「结构」；荧光强度变
吖啶橙或溴化乙锭染色1c)将1μL的染色混合液放至12 mm×75 mm的玻璃试管的底部。加入25μL细胞悬浮液，用手腕轻柔地混合。2c)将10μL的该混合液放在一干净的显微镜载玻片上，盖上22 mm2的盖玻片。用一 落射光显微镜的40×到60×的干物镜和一适合观察荧光素的滤光片结合起来检查。3c)计数至少200个细胞，记录以下四个细胞状态的每一个数值：①有正常核的活细胞 (VN；有结构的亮绿色染色质）；②有凋亡核的
相关产品推荐
