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离子交换法制备肝素实验

实验分类:

生物化学实验

最新修订时间:

简介

肝素(Heparin)是一类酸性粘多糖,对碱和热较稳定,在生物体内以与蛋白质结合的复合物形式存在,常用的是盐解和酶解法分离,然后加热过滤将其除去。由于肝素分子在碱性条件下有很强的负电性,所以在一定的pH和离子强度下可被阴离子交换树脂吸附,经富集、洗脱、沉淀可获得粗制品。(来源:生物化学与分子生物学实验指导,邵雪玲 等,武汉大学出版社,2003)

来源:丁香实验

操作方法

离子交换法

溶液配制: 1. 巴比妥缓冲液(pH 8.6,0.05 mol/L):称取1 g氢氧化钠溶于50 ml沸水 ,再精确称取二己基巴比妥酸5052 g溶于上述溶液中,冷却后稀释至500 ml,pH计校正到pH8.6。 2. 0.1%阿拉伯胶溶液:称取0.5 g,先用少量水分散,再稀释至500 ml,过滤备用。 3. 0.1%天青A溶液(称取0.5 g,先用少量水在研钵中研磨溶解,再稀释至500

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