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简介
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原理
抗体生物素标记是指将标记物(生物素)共价偶联到抗体上,标记后的抗体蛋白与待检测物(如免疫蛋白)特异性反应形成多元复合物,并借助于酶标检测仪、流式细胞仪等精密仪器对试验结果进行自动化测定,从而对待测物进行定性和定量测定。
来源:实验心得(湖南省重点表观遗传学实验室)、赛默飞生物素标记试剂说明书
操作方法
1、生物素标记抗体(1)根据 Thermo 的说明书,将所用试剂及待标记抗体恢复至室温,称取一定量的生物素,使用无菌水溶解并稀释生物素至终浓度为 5.5 mg/mL。(例:每 1.0 mg 生物素用 180 μL 的无菌纯水溶解成 5.5 mg/mL 的溶剂。)(2)生物素与抗体质量比例为 5~20:1,将计算好的对应质量的生物素及待测抗体混合,总体积要大于 100 μL。(3)室温下避光旋转反应
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