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荧光原位杂交技术(FISH)

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简介

荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术,具有快速、安全、杂交特异性高、可以多重染色等特点,因此在分子细胞遗传学领域受到普遍关注。

原理

按照碱基互补配对的原则,用半抗原标记 DNA 或者 RNA 探针与经过变性的单链核酸序列互补配对,通过带有荧光基团的抗体去识别半抗原进行检测,或者用荧光基团对探针进行直接标记并与目标序列结合,最后利用荧光显微镜直接观察目标序列在细胞核、染色体或切片组织中的分布情况。

应用

目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究等许多领域。

来源:① 陈成忠、于洪芹. 荧光原位杂交技术及其应用[J]. 生物学教学, 2007, 32(1):3. ② 何世斌、柴连琴、 谭珺隽等. 荧光原位杂交技术的研究进展[J]. 植物科学学报, 2014, 32(2):199-204. ③ Nilsson, O. R., Kari, L., Rosenke, R., & Steele-Mortimer, O. (2022). Protocol for RNA fluorescence in situ hybridization in mouse meningeal whole mounts.STAR protocols,3(2),101256.

操作方法

🔥 RNA-FISH

荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术,具有快速、安全、杂交特异性高、可以多重染色等特点,因此在分子细胞遗传学领域受到普遍关注。

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