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简介
在浓缩样品的同时,可以去除核酸并且能够使目标蛋白质得到一定程度的富集。我们发现一种作用显著的树脂,即 Affi-GelBlue。多年来,Affi-GelBlue作为亲和层析树脂已经用于数百种蛋白质的纯化,主要是用于纯化步骤的后续阶段(见 Bio-Rad Bulletin 1107,biorad.com)。通过这种方法,部分目标蛋白质可以与树脂结合 ,并可采用梯度盐或特异性的配体进行洗脫。本章将重点讨论Affi-Gel Blue在纯化早期程序中的使用,一般采用直接混合的形式实现纯化目的。
作者: 伯吉斯等,主译:陈薇,本实验来自「蛋白质纯化指南」
来源:丁香实验
操作方法
一、典型的方案 对 于 上 清 液 组 分 ,可 在 低 速 (S 10) 或 高 速 (S 100) 的 条 件 下 进 行 上 样 。一 般 更 倾 向 于在 高 速 条 件 下 上 样 ,因 为 可 以 排 除 核 糖 体 或 微 粒 体 的 干 扰 。所 用 层 析 柱 的 大 小 取 决 于 样品 量 的 多 少 。 一 个 有 用 的 经 验方法则 是 样 品 中 每
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