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简介
感染了杆状病毒的草地贪夜蛾(Sf9 ) 昆虫细胞的细胞核提取物编码猿猴病毒40(S V 4 0 ) 的主要外壳蛋白(V P l )。在 有 M g C l 2、 CaCl2 和 A T P 存在时,这些核提取物能包装超螺旋结构的质粒D N A 或 R N A 干 扰 (R N A i ) 序列,从而在体外形成S V 40假病毒体。这种包装方法和其他病毒或非病毒传递系统相比有许多优点。特别是它拥有广泛的宿主范围和髙转化率。这个系统唯一的缺点是体外观察到每个转化细胞的表达量过低 ,可能是由于产生的D N A 被限制在细胞质中,不能进入到细胞核内。
作者:T.弗里德曼等,译者:殷勤伟等,本实验来自「基因转移」
来源:丁香实验
操作方法
S V 4 0 体 外 传 递 系 统 材料 试剂 A T P (10 0 m m o l/ L ;R oche) 缓冲液 I 10 m m o l/L H E P E S (p H 7. 9) 10 m m o l/L K C l 0.lm m o l/L E D T A 0 . 1 m m ol/L E G T A