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简介
松猴疱疼病毒(H V S ) 可以高效地感染多种人体细胞。它的基因组是环状、多拷贝的非整合游离基因,可以在细胞分裂的时候分离,产生子代病毒。这种特性使得基于H V S 而构建的载体可以稳定转导处于分裂期的细胞群,且可以使导人的基因在体内或体外维持较长时期稳定地表达。此外,还可以在松猴疱疹病毒(H V S ) 基因组中插人细菌人工染色体(B A C ) 表达框,这简化了大片段异源性D N A 的转导过程。这些特性相当于使人工染色体与一个高效的转染系统相结合。
作者:T.弗里德曼等,译者:殷勤伟等,本实验来自「基因转移」
来源:丁香实验
操作方法
构建基于 H V S 的重组载体 材料 试剂 牛 血 清 白 蛋 白(B S A ; 10 % ) 细 胞 : E le ctro m ax D H lO B 细 胞(In vitro g e n ); O M K 细胞 氯 霉 素(50ull/m l) D M E M 补 充 如 下 物 质 : 2 m m o l/ L 谷 氨 酰
用 表 达 HVS-GFP 的 H V S 病毒重组体检测 H V S 的感染效率用 表 达 HVS-GFP 的 H V S 病毒重组体检测 H V S 的感染效率 材料 试剂 1.细胞:目的细胞株 2.DMEM 培 养 基(Dulbecco’s modified Eagle’s medium) 3•胎牛血清(F B S ) 4•潮霉素(250fil/m l ; Invitrogen) 5.病毒: H V &a
Gardella凝胶分析Gardella凝胶分析 材料