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构建由 2A 多肽连接的多顺反子载体

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简介

这一章介绍通过使用2A 多肽连接的多顺反子载体从单一可读框来表达多重蛋白质的方法。当这些
小的序列被克隆到基因间区时,它们允许通过在2A 多肽序列中的一个新颖的切割方式从单一的载体上高效地产丰不相连的蛋白质产物。
作者:T.弗里德曼等,译者:殷勤伟等,本实验来自「基因转移」

来源:丁香实验

操作方法

通过重组 PCR 产 生 2A 连接的多顺反子可读框

通过重组 PCR 产 生 2A 连接的多顺反子可读框 材料 试剂 适合纯化D N A 的琼脂糖凝胶 煮 沸2〜3m i n 在 I X T A E 中溶解高纯度的琼脂糖。 55°C水浴直到温度平衡。加 3〜5M EB。胶凝后, I X T A E 充满容器,去掉梳子。超 过 500b p 片段的使用 1 % 琼脂糖胶。较小产物,琼脂糖浓度提高2% 。

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