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非整合型载体介导的基因导入技术

实验分类:

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简介

以腺病毒为代表的非整合型载体介导的基因导入技术可用于基因治疗试验和研究。

目前基因导入技术是制备ips细胞的主要技术,基因载体的改良推动无遗传修饰ips细胞的建立。载体主要有整合型载体、非整合型载体以及新型载体。腺病毒载体、RNA病毒、附着体和质粒都属于整合型载体。

来源:丁香实验

操作方法

腺病毒介导EGFP基因转染神经干细胞

一、NSCS的分离、培养及鉴定取新生大鼠置于0.5%碘伏中消毒,取脑,分离海马,剥离脑膜血管,将海马组织移入含有2%B27的高糖DMEM/F12培养液中,尽量将组织剪碎,轻轻吹打制成细胞悬液,400目筛网过滤,台盼蓝染色,细胞计数,以2×106个/L接种到6孔培养板内,最后加入EGF(终浓度20 μg/L)和bFGF(终浓度20 μg/L),置37℃、5% CO2平衡湿度培养箱中。每2——3天半量

附着体载体介导法

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