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人血性单核巨噬细胞的诱导及分离

实验分类:

免疫学实验

最新修订时间:

简介

巨噬细胞(macrophages,MΦ)是由血液中单核细胞迁入组织后分化形成的成熟类细胞,广泛分布于脾脏、肝脏、腹腔、神经系统以及结缔组织等,具有吞噬杀伤、抗原提呈及免疫调节作用。近年的研究发现巨噬细胞在不同微环境中可以发生不同性质的活化,成为具有不同表面分子和功能特征的亚群。根据其不同的表型特点和功能特点及对 Th1/Th2 应答的诱导,通常将其分为两种类型:经典活化的巨噬细胞(classically activated macrophage,CAM),又称 M1 型巨噬细胞;替代性活化的巨噬细胞(alternatively activated macrophage,AAM),又称 M2 型巨噬细胞。M1 型巨噬细胞具有杀灭微生物、参与炎症及抗肿瘤作用。M2 型巨噬细胞具有很强的免疫调节、组织修复及抗炎能力。

原理

人血性单核巨噬细胞 Ficoll 密度梯度离心法分离的基本原理是分层液聚蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)比重为 1.077 ± 0.001。Ficoll 的密度为 1.2 g/ml,未超出正常生理性渗透压,亦不穿过生物膜,因而不影响单个核细胞的形态及功能。红细胞、粒细胞比重大(1.092),离心后沉于管底;淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重(1.070),离心后漂浮于分层液的液面上,吸取分层液液面的细胞,即为外周血单个核细胞。依据单核巨噬细胞能够贴壁的特性,进一步将贴壁的单核巨噬细胞与未贴壁的淋巴细胞分开。单核细胞体外培养时可加入一定量的 rhGM-CSF,进而促进单核细胞转化为巨噬细胞。

来源:丁香实验团队

操作方法

人血性单核巨噬细胞Ficoll密度梯度离心法分离

巨噬细胞(macrophages,MΦ)是由血液中单核细胞迁入组织后分化形成的成熟类细胞,广泛分布于脾脏、肝脏、腹腔、神经系统以及结缔组织等,具有吞噬杀伤、抗原提呈及免疫调节作用。近年的研究发现巨噬细胞在不同微环境中可以发生不同性质的活化,成为具有不同表面分子和功能特征的亚群。根据其不同的表型特点和功能特点及对 Th1/Th2 应答的诱导,通常将其分为两种类型:经典活化的巨噬细胞(classica

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