单克隆抗体的纯化

实验分类：

免疫学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

单克隆抗体的纯化可用于：（1）制备体外诊断试剂；（2）制备治疗用药。

来源：丁香实验

操作方法

蛋白A-琼脂糖纯化

1)将蛋白 A-琼脂糖置于 50 倍体积的 Tris 缓冲液中充分溶胀。在室温下将其灌入直径为 2.5 cm 玻璃层析柱中，用 Tris 缓冲液平衡。10-20 mL 腹水中的抗体，可用干重大约为 3 g 的蛋白 A-琼脂糖纯化。2)腹水液稀释于 3 倍体积的 Tris 缓冲液，以 1-5 mL/min 的速度上样于蛋白 A-琼脂糖柱，用 Tris 缓冲液洗柱子直至所有的未结合的蛋白质都被洗脱，采

抗原-葡聚糖和抗鼠1g-葡聚糖进行纯化

1)将3.3 g CNBr活化葡聚糖4B溶胀于1 mmol/L HCl中（可得10 mL溶胀的凝胶），然后转移至玻璃砂芯漏斗中，并用：（a) 200-500 mL 的1 mmol/L HCl； (b) 200- 500 mL偶联缓冲液。依次洗涤>30 min。2)将葡聚糖凝胶转移至 50 mL 锥形塑料离心管中，加 50-100 mg 的配体（2-5 mg/mL), 混匀后置摇动平台 4℃