抗原和免疫血清的制备实验

实验分类：

免疫学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫特异性的球蛋白。在免疫学实践，为制备抗体常以抗原性物质（细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质）给动物注射。经过一定时间后，动物血清中可以产生大量的特异性抗体。这种含有特异性抗体的血清称为免疫血清。

来源：丁香实验

操作方法

抗菌血清的制备

1. 抗原的制备：标准菌株的选择：所用的菌种伤寒杆菌H901和伤寒杆菌O901应具有典型形态菌落及生化反应。在生理盐水中不发生自身凝集，与特异血清有高度凝集者可作为菌种。 2. 菌液的制备（1）原液制备： H菌液的制备：将合格的伤寒杆菌H菌株接种于普通琼脂的克氏瓶或大试管内 37℃孵育18—24小时。肉眼观察有无杂菌生长，必要时作镜检。用无菌甲醛生理盐水洗下菌苔，将

抗红细胞抗体（溶血素）的制备

1. 红细胞悬液的制备（1）采血采取的绵羊血与灭菌的保存液等量混合，置冰箱中，可保存数周，也可用抗凝方法（2）洗涤血球先将抗凝血液离心沉淀（2000 cpm×5分钟）吸去上清。加入2~3倍的生理盐水并用毛细滴管反复吹打混匀，离心沉淀5分钟，吸去上清液。如此连续洗3次，最后一次可离心沉淀10分钟以使血球密集管底。直至上清液透明无色再吸去上清夜，留密集血球备用。

抗人血清抗体的制备

1. 弗氏佐剂的制备将羊毛脂与石蜡油按1：5比例混合，高压灭菌。 2. 人血清—弗氏完全的制备将灭菌佐剂一份置研钵中，边研磨边滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液，使成油色水乳剂，研磨要充分，使乳剂滴入冰水中不扩散。 3. 免疫动物可采用一次性免疫法，即将抗原与佐剂制成的乳剂分多个点兔背部皮肤，也可注入足底2~4针各0.45毫升，总量约3毫升，一个月后试