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简介
原理
来源:丁香实验团队
操作方法
机械破碎法进行生物样品预处理,也称为匀浆(homogenization),是利用机械力将细胞破碎。常用的设备有高速组织捣碎机、匀浆器、研钵等。高速组织捣碎机具有高速转动的锋利刀片,多用于破碎组织块。玻璃匀浆器是利用两个磨砂面相互摩擦将细胞磨碎,但仅适用于少量的实验材料。小量的样品可用研钵与适当的缓冲剂磨碎提取,可加入氧化铝、石英砂及玻璃粉一起研磨。应该根据不同组织的特性来选择不同的方法。例如动物胰
超声破碎法进行生物样品预处理超声破碎法进行生物样品预处理是利用振荡频率为 15~25 k Hz 的超声波在细胞液中产生的空化效应和机械效应将细胞膜破碎的方法,多用于细胞裂解。
反复冻融法进行生物样品预处理反复冻融法进行生物样品预处理是将细胞在 - 20 ℃ 以下或液氮条件下冰冻,室温融解,反复多次。该方法简单方便,成本低,可适用于大规模操作,但过程缓慢,并且不适宜对温度变化敏感的蛋白质。
表面活性剂裂解及酶解法进行生物样品预处理表面活性剂裂解及酶解法进行生物样品预处理是利用各种表面活性剂或生物酶将细胞壁分解,使细胞内的蛋白质释放出来。