简介
超声破碎法进行生物样品预处理是利用振荡频率为 15～25 k Hz 的超声波在细胞液中产生的空化效应和机械效应将细胞膜破碎的方法，多用于细胞裂解。
原理
超声破碎法进行生物样品预处理的基本原理是是利用振荡频率为 15～25 k Hz 的超声波在细胞液中产生的空化效应和机械效应将细胞膜破碎的方法，多用于细胞裂解。
用途
超声破碎法进行生物样品预处理的常用应用领域如下：
将组织细胞或培养细胞破碎，使细胞内物质释放到缓冲液中。
材料与仪器
试剂：
缓冲液
仪器：
超声仪
步骤
超声破碎法进行生物样品预处理的基本过程如下：
超声前，先将菌液离心，再用 PBS 将菌沉淀洗 2～3 次，然后按原菌液体积的 1/5～1/10 加入裂解液重悬菌体。
注意事项
超声破碎中应注意：
① 为了避免在溶液中产生泡沫，要将超声探头完全置于液面以下，并在不碰触的前提下尽可能靠近容器底部。
② 应该使用塑料试管而避免使用玻璃试管。
③ 超声剂量应由样品量和菌体来决定，功率可以在 200～600 W。过强的超声波可导致多聚物降解和蛋白质失活。如果超声时出现黑色沉淀，说明超声功率太强。
④ 处理一些超声波敏感的蛋白质酶时应控制超声时间和超声能量，一般采用超声 5～10 秒、停止 5～10 秒，多次反复进行的方法。
⑤ 将试管置于冰水中以避免蛋白质变性和失活。利用超声波破碎时，一般杆菌比球菌易破碎，而酵母菌的效果较差。
评价超声破碎效果的几点经验是：
① 外观判断：超声前菌悬液或细胞悬液是浑浊的，超声后应是清澈透明的；
② 液体的黏滞性：超声后的菌液不应粘枪头；
③ 高速离心：高速离心（一般 6000 g，10 分钟）后，沉淀是未破碎或破碎不完全的菌体；
④ 染色：破碎后的菌液涂片，革兰结晶紫溶液染色 0.5 分钟，镜检。另外，可以在超声后加入核酸酶消除核酸对蛋白质的污染。
来源：丁香实验
