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翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验

实验分类:

蛋白质实验

最新修订时间:

简介

蛋白质翻译后修饰 (PTM) 在细胞生物调节中发挥着基本作用。PTM 是 mRNA 翻译后蛋白质的酶促共价化学修饰。蛋白质化学修饰非常重要,因为它们会潜在地改变蛋白质的物理或化学性质、组成、活性、细胞定位或稳定性。实际上,在氨基酸或蛋白质的 N 端或 C 端加入或移除化学基团会导致大部分蛋白质发生变化。一些 PTM 可以被动态地添加或移除,这是一种可逆的蛋白质功能调控机制。目前超过 400 个特定的蛋白质修饰已被鉴定,也许还有更多的修饰类型有待发现 (CreasyandCottrell,2004)。迄今为止最常见的 PTM 有磷酸化、苏素化、泛素化、亚硝基化、甲基化、乙酰化、硫酸化、糖基化及酰基化。

来源:丁香实验

操作方法

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验

一、引言 蛋 白 质 翻 译 后 修 饰 (P T M ) 在 细 胞 生 物 调 节 中 发 挥 着 基 本 作 用 。 P T M 是 m R N A 翻译 后 蛋 白 质 的 酶 促 共 价 化 学 修 饰 。蛋 白 质 化 学 修 饰 非 常 重 要 ,因 为 它 们 会 潜 在 地 改 变 蛋白 质 的 物 理 或 化 学 性 质 、组 成 、活 性 、细 胞 定 位

蛋白质乙酰化

1、步骤见 Western blot;2、质谱:① 细胞或组织蛋白抽提;② 凝胶或溶液内蛋白酶切;③ 乙酰化肽段富集(乙酰化抗体);④ HPLC 肽段分离;⑤ 串联质谱分析;⑥ 乙酰化位点数据分析

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