凝胶过滤实验

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

蛋白质纯化的层析技术中，凝胶过滤比较独特,它是基于蛋白质分子质量的相对大小而分离。与传统的过滤相反，通过凝胶过滤柱后,并没有任何蛋白质留存于其中。凝胶过滤优缺点明显;优点在于，脆性蛋白质与层析固定相结合并不会破坏其功能;缺点在于,和凝胶不结合则限制层析的分辨率。
作者：伯吉斯等,主译：陈薇，本实验来自「蛋白质纯化指南」

来源：丁香实验

操作方法

凝胶过滤实验

操作采用分子筛层析获得的洗脱图谱如图 23.1 A 所 75。零洗脱体积 (zero elution volu m e ) 是指上样于层析固定相的样品体积。无法进入介质的分子的洗脱体积定义为无效体积 V 。，它表示颗粒外部的体积。可以进人介质的分子的体积定义为总体积％, 它表示颗粒内部体积及外部体积的总和。介于两者之间的洗脱体积即为 V e。分配系数为 K av，