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哺乳动物细胞瞬时基因转移法制备重组蛋白实验

实验分类:

蛋白质实验

最新修订时间:

简介

报道显 TK,在 过 去 的 1 0 年 ,已经开发出 了多种高效的瞬时转染(transient transfection) 方法 , 它们可 以 满 足 甚 至 超出 了 上 述 需 求 。 目 前 蛋 白 质 的 瞬 转 表 达 主 要 是 在H E K 2 9 3 衍生的细胞系中进行, 而同时研究人员也在努力发展针对 C H O 细胞的效率相当的方法。这有利于维持相同的宿主细胞背景,从而在治疗用蛋白质的整个研发过程中可以使产品的性质保持一致。有 关 当 前 T G E 的详细总结可参考一些最近发表的综述。
作者: 伯吉斯等,主译:陈薇,本实验来自「蛋白质纯化指南」

来源:丁香实验

操作方法

哺乳动物细胞瞬时基因转移法制备重组蛋白实验

一、转染方法 对于脂质体转染 (Upofection), 可以从商业途径获得许多配方,这些配方都具有单一的专利化组分,而且毫无疑问,它们中的大部分都能非常有效地将质粒 D N A 转 人 细 胞 。其缺点是价格不菲—- 在使用这些试剂时,对于超出数百毫升规模的瞬时转染,经济上是不可行的。大规模的瞬时转染方法要求转染试剂能很容易大量获取, 批次间的变化小以保证转染的一致性。尽管也存

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