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过载染色 SDS 凝胶扫描法估测纯度实验

实验分类:

蛋白质实验

最新修订时间:

简介

由于蛋白质在 SDS 凝胶上可得到高分辨分离,并可用考马斯亮蓝(CBB) 给予灵敏的染色,故按本单元实验 4 所述的方法,对经 SDS 凝胶分离的蛋白质制备物进行染色和脱色后扫描,可得到蛋白质样品的纯度。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。

来源:丁香实验

操作方法

过载染色 SDS 凝胶扫描法估测纯度实验

试剂 考马斯亮蓝(CBB) 染色液 脱色液 (配方,见“试剂的配制”,PP.184~189) 操作程序 1) 按实验 4(pp.159~160) 所述,取一较纯蛋白质的若干稀释的样品(约含 1、3、10 和 30ug 的总蛋白), 于小型 SDS-聚丙烯酰胺(10%) 凝胶进行电泳、染色和脱色。 2) 对已脱色的凝胶扫描,测定主带(推测是目的蛋白)及各副带(推测是很明显的杂蛋白)中所含

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