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尿素梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳与折叠分析实验

实验分类:

蛋白质实验

最新修订时间:

简介

Goldenberg 和 Creighfn(1984) 引入用含尿素浓度梯度的聚丙烯酰胺凝胶来分析蛋白质的折叠状态。对该操作程序的进一步描述连同技术考虑和理论解释均可见于 Goldenberg(1989) 的文献。下面的操作程序是根据 Goldenberg 和 Creighton(1984) 及 Goldetiberg(1989) 的文献改进而成的。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。

来源:丁香实验

操作方法

尿素梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳与折叠分析实验

材料与设备 丙烯酰胺 双丙烯酰胺 Tris-乙酸缓冲液(0.5mol/L;pH8.0) 核黄素(0.04mg/ml水溶液) 尿素(晶体;商用超纯级或经去离子处理以除去氰酸盐) 具搅拌平台的线性梯度混合器 N,N,N',N'-四甲基乙二胺(TEMED) 蠕动泵,带硅胶管的 平板注胶架 注胶用玻板(只用方形板,不用为多孔梳刻有凹槽的玻板) 隔条’(标准胶用的两根侧隔条和两根底隔条

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