血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶具有机械强度好、弹性大、透明、化学稳定性高、无电渗作用、设备简单、用样量少和分辨率高等优点,并可通过控制单体浓度或单体与交联剂的比例聚合成孔径大小不同的凝胶,用于蛋白质、核酸等物质的分离、定性和定量分析。
根据凝胶形状不同分为盘状电泳和板状电泳。盘状电泳是在直立的玻璃管中,利用不连续的缓冲液pH值进行电泳而命名,同时,样品混合物分开形成的带很窄,呈圆盘状,因此圆盘电泳这个名字成了不连续性和盘状的双关语。不连续盘状电泳具有很高分辨力,这是由于有三种效应存在、浓缩效应、电荷效应和分子筛效应。
血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳实验一、试剂
1.分离胶缓冲液(pH8.9):取Tris36.3克加入1NHC148ml,再加水到100ml。
2.单体交联剂:取丙烯酰胺30g,N-N-亚甲基双丙烯酰胺0.8g,加蒸馏水到100ml。
3.浓缩胶缓冲液(pH6.7):取Tris5.98g加1NHC148ml,加蒸馏水到100ml。
4.加速剂:四甲基乙二胺。
5.催化剂:10%过硫酸铵,取AP1克加水到10ml。临用前现配