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动物基因组 DNA 的分离纯化实验

实验分类:

蛋白质实验

最新修订时间:

简介

本实验目的是掌握盐溶法大量制备动物基因组DNA 的基本原理和方法,根据核糖核蛋白与脱氧核糖核蛋白在一定浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同进行分离, 然后用蛋白质变性沉淀剂去除蛋白,使核酸释放出来, 再利用核酸不溶于乙醇的性质将核酸析出, 达到分离提纯的目的。

来源:丁香实验

操作方法

盐溶法

新鲜猪肝4 g , 用SC 溶液洗去血液, 低温剪碎后, 加入8 ml上述溶液, 继续捣碎, 将匀浆物于4000 r/ min 离心10 min , 上层是RNP 提取液, 下层是DNP 及细胞碎片。将上层倾出( 也可留下制备RNA) , 下层再用5 ml SC 溶液重复抽提两次, 以减少RNP 对DNP 抽提的影响。 下层沉淀移入三角烧瓶, 加同上溶液20 ml , 混匀, 加4

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