凝胶阻滞实验分析 RNA- 蛋白质作用常数实验

RNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

凝胶阻滞实验（gel reiardadon assay，又称为 mobthty shift assay）方法简单、灵敏，可以定量的特性使它在研究转录和基因调控中广泛的应用。目前通常用于 RNA ( 或 DNA ) 结合蛋白的纯化，确定一种已知或可能的 RNA 结合蛋白所识别的序列，建立反应常数（如亲和常数和解离常数）等。在本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。

来源：丁香实验

操作方法

凝胶阻滞实验分析RNA-蛋白质作用常数实验

一、材料与设备 1. 标记 RNA 片段、未标记的同种 RNA。 2. 待分析蛋白质。 3. DEPC 处理的水。 4. 10X 结合缓冲液：200 mmol/L Tris-HCl（pH 7.5），500 mmol/L KCl，50 mmol/L MgCl2，10 mmol/L 二硫苏糖醇，10% 甘油，1 mg/ml 牛血凊白蛋白。2X 此缓冲液的储存液也可以选择使用。 5. 釆用标准