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凝胶阻滞实验分析 RNA- 蛋白质作用常数实验

实验分类:

RNA 实验

最新修订时间:

简介

凝胶阻滞实验(gel reiardadon assay,又称为 mobthty shift assay)方法简单、灵敏,可以定量的特性使它在研究转录和基因调控中广泛的应用。目前通常用于 RNA ( 或 DNA ) 结合蛋白的纯化,确定一种已知或可能的 RNA 结合蛋白所识别的序列,建立反应常数(如亲和常数和解离常数)等。在本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。

来源:丁香实验

操作方法

凝胶阻滞实验分析RNA-蛋白质作用常数实验

一、材料与设备 1. 标记 RNA 片段、未标记的同种 RNA。 2. 待分析蛋白质。 3. DEPC 处理的水。 4. 10X 结合缓冲液:200 mmol/L Tris-HCl(pH 7.5),500 mmol/L KCl,50 mmol/L MgCl2,10 mmol/L 二硫苏糖醇,10% 甘油,1 mg/ml 牛血凊白蛋白。2X 此缓冲液的储存液也可以选择使用。 5. 釆用标准

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