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液相法筛选 cDNA 表达文库中 RNA 结合蛋白实验

实验分类:

RNA 实验

最新修订时间:

简介

将 cDNA 文库表达的蛋白固定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上,然后用标记的 RNA 对其进行筛选的方法是筛选 RNA 结合蛋白研究中最常用的技术。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。

来源:丁香实验

操作方法

液相法筛选cDNA表达文库中RNA结合蛋白实验

一、材料与设备 1. 2X TY:16 g 蛋白胨,10 g 酵母提取物,5 g NaCl,水定容至 1 L,高压灭菌。 2. 储存液:1 mol/L IPTG;1 mol/L DTT;100 mmol/L PMSF( 用无水异丙醇配制);均分装后 -20℃ 保存。 3. 溶菌酶干粉,-20℃ 保存。 4. 细菌裂解缓冲液:150 mmol/L NaCl,50 mmol/L Tris-HC

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