液相法筛选 cDNA 表达文库中 RNA 结合蛋白实验

实验分类：

RNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

将 cDNA 文库表达的蛋白固定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上，然后用标记的 RNA 对其进行筛选的方法是筛选 RNA 结合蛋白研究中最常用的技术。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。

来源：丁香实验

操作方法

液相法筛选cDNA表达文库中RNA结合蛋白实验

一、材料与设备 1. 2X TY：16 g 蛋白胨，10 g 酵母提取物，5 g NaCl，水定容至 1 L，高压灭菌。 2. 储存液：1 mol/L IPTG；1 mol/L DTT；100 mmol/L PMSF( 用无水异丙醇配制）；均分装后 -20℃ 保存。 3. 溶菌酶干粉，-20℃ 保存。 4. 细菌裂解缓冲液：150 mmol/L NaCl，50 mmol/L Tris-HC