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植物 RNA 的制备实验

实验分类:

RNA 实验

最新修订时间:

简介

由于RNA的种类来源很多,因而提取制备方法各异,一般有苯酚法,去污剂法和盐酸胍法,其中苯酚法实验室最常用。组织匀浆后用苯酚处理离心,RNA即溶于上层被酚饱和的水相中,向水相加冷乙醇后, RNA即以白色絮状沉淀析出。此法较好除去DNA和蛋白质,且获得生物活性的RNA。

来源:丁香实验

操作方法

酚/SDS法

1. 研钵和研棒先用液氮冷却,称出15 g 冻结植物组织于研钵中(加液氮保持冻结)。 2. 用研棒磨成粉末,立即转移到一个盛有150 ml,研磨缓冲液和50 ml TLE缓冲液平衡酚的500 ml 烧杯中。 3. 用Poltroon匀浆器,设定在5~6挡匀浆2 min,加入50 ml 氯仿,并用匀浆器在低速下混匀。 4. 将混合物移至500 ml 的Nalgene离心瓶中

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