准备插入片段实验

实验分类：

PCR 技术

最新修订时间：2022-02-10

简介

本实验介绍插入片段的准备工作。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

来源：丁香实验

操作方法

准备插入片段实验

第 1 阶段：DNA 引物的激酶处理研究表明很多种 DNA 聚合酶（比如，T7、修饰过的 T7、Taq、Vent、Tth 和 Klenow)具有脱氧核苷酸末端转移酶（Tdt) 活性（Clark1988;Hu1993)。DNA 聚合酶将 PCR 产物 3'端的核苷酸延伸，这个反应具有核苷酸以及聚合酶的专一性。比如，：Taq DNA 聚合酶产生的 PCR 产物更倾向于按下面形式修饰（+表示延伸；一