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差异 DNA 的 PCR 扩增实验

实验分类:

PCR 技术

最新修订时间:

简介

在本方案所描述的反应中,差异 DNA 被选择性地扩增。每个实验至少应该有 4 个反应:①已消减的检测 DNA;②未消减的检测者对照(1-c);③反向消减的检测 DNA;④反向未消减的对照(2-c)。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。

来源:丁香实验

操作方法

差异 DNA 的 PCR 扩增实验

一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂 dNTP 溶液(包含所有 4 种 dNTP,各 10 mmol/L) 2. 酶和酶缓冲液 PCR 反应缓冲液,10X 聚合酶混合液,50X(Advantage2,Clontech,或相当产品) 3. 核酸和寡核苷酸 DNA 样品(即方案 2 第 16 步中的各消减样品) 嵌套 PCR 引物 NP1(10umol/L) 嵌套 PCR 引物 NP2

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