差异 DNA 的 PCR 扩增实验

PCR 技术

最新修订时间：2022-02-10

简介

在本方案所描述的反应中，差异 DNA 被选择性地扩增。每个实验至少应该有 4 个反应：①已消减的检测 DNA;②未消减的检测者对照（1-c);③反向消减的检测 DNA;④反向未消减的对照（2-c)。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

来源：丁香实验

操作方法

差异 DNA 的 PCR 扩增实验

一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂 dNTP 溶液（包含所有 4 种 dNTP，各 10 mmol/L) 2. 酶和酶缓冲液 PCR 反应缓冲液，10X 聚合酶混合液，50X(Advantage2，Clontech，或相当产品） 3. 核酸和寡核苷酸 DNA 样品（即方案 2 第 16 步中的各消减样品）嵌套 PCR 引物 NP1(10umol/L) 嵌套 PCR 引物 NP2