建立一个实时 PCR 定量分析实验

PCR 技术

最新修订时间：2022-02-10

简介

对于一个新的靶分子建立实时 PCR 定量分析的过程包括：①设计步骤一 PCR 引物和探针的选择；②根据特定分析的要求，选择实时 PCR 的检測方法。使用 SYBRGreen 的实时 PCR 通常被用于优化引物，且被主要用于在研究中检测 PCR 产物 TaqMari 探针和分子信号提供了更好的特异性。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

来源：丁香实验

操作方法

建立一个实时 PCR 定量分析实验

一、材料 1. 缓冲液和溶液 MgCl2(25 mmol/L) 探针（例如分子信号）或 SYBRGreen(MolecularProbes) 2. 酶和酶缓冲液 HotStmMix，2X(含有 TaqDNA 聚合酶、PCR 缓冲液和 dNTP) 3. 核酸和寡核苷酸正向和反向扩增引物模板 DNA 4. 专用设备实时 PCR 仪合适的反应管、毛细管或 96 孔的微量滴定