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STR分型分析实验

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

STR 指 DNA 中两个以上核苷酸直接彼此相邻的重复模式,通过对基因组特异位置特异序列重复数的鉴定可能实现个体的遗传剖析。在法医学案件侦查中,STR 分析已经成为了一项十分普遍的遗传鉴定手段。目前,用于 STR 分型分析实验的方法主要有 3 种:基于平板胶和毛细管电泳分析 STR 分型、基于基因芯片分析 STR 分型和基于质谱分析 STR 分型。


原理

STR 分型分析实验的基本原理是 STR 左右两端的序列在同 物种中具有高度保守性,因而可以根据这一特性进行引物设计,PCR 扩增所得的不同大小的片段即代表了 STR 片段中重复序列的多样性, STR 分型方法在实际操作中转化为核酸片段大小的精确分离鉴定。


来源:丁香通实验团队

操作方法

基于平板胶和毛细管电泳分析 STR 分型

平板胶电泳是强大的 DNA 分离方法,STR 片段可以通过银染进行成像,通过片段大小进行判断。将荧光引物加入到 STR 分型方法中,可进行毛细管阵列电泳,取得单碱基的分辨率,检测时间得到了大大缩短。原理STR 左右两端的序列在同 物种中具有高度保守性,因而可以根据这一特性进行引物设计,PCR 扩增所得的不同大小的片段即代表了 STR 片段中重复序列的多样性, STR 分型方法在实际操作中转化为核酸

基于基因芯片分析 STR 分型

电子芯片技术将微型装配、化学和分子生物学结合起来,实现了 NA 样品的快速、微型化和多重分析,其检测技术原理基于 DNA 探针杂交技术,利用高分辨率的影像分析技术,有效提升了高通量的数据处理分析能力。原理基因芯片技术涉及等位基因特异性的核酸杂交, DNA 探针固定在不可渗透的固体表面,极大程度地减少了反应溶液体系和杂交所需时间,一张芯片可同时检测数以万计的 SNP 位点,绿色或红色荧光分别代表 A

基于质谱分析 STR 分型

MALDI-TOF-MS 在寡聚核苷酸分析领域同样具有高速以及惊人的灵敏性和准确性,它根据核酸片段真实的分子最来将不同大小的 STR 片段明显分辨开来。原理质谱法的基本原理是使含不同 STR 片段的核酸和基质分子在离子源中发生电离,将基质的质子转移到核酸,生成不同荷质比的带正电荷离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。在质量分析器的电场和磁场中,离子束发生相反的速度色散、聚焦而得到质谱

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