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BSP 克隆测序法

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

对DNA进行甲基化检测

原理

用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后再CpG岛两端设计引物进行PCR,将目的产物纯化后进行TA克隆,每个克隆挑取阳性克隆测序,最后将测得的序列与原始序列比对,统计甲基化位点及数量,并分析甲基化程度。

应用

甲基化检测

来源:丁香实验

操作方法

BSP克隆测序法

基因组DNA制备亚硫酸氢盐修饰DNA纯化与回收PCR扩增产物克隆测序

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