去磷酸化的平端或 5' 凹端 DNA 分子的磷酸化

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

在 T4 多核苷酸激酶的正向反应中，带有平端、5' 凹端或分子内切口的 DNA 底物比 5' 突出端的分子标记效率低。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

去磷酸化的平端或5'凹端DNA分子的磷酸化

一、方法 1. 缓冲液和溶液乙酸铵（10 mol/L） EDTA ( 0.5 mol/L，pH 8.0）乙醇 10X 咪唑缓冲液（500 mmol/L 咪唑盐酸（pH 6.4），180 mmol/L MgCl2，50 mmol/L DTT，1 mmol/L 亚精胺盐酸，1 mmol/L EDTA (pH 8.0)）水配制聚乙二醇（24% m/V PEG 8000) 2. 酶和缓