从 M13 噬菌体模板合成非固定长度的单链 DNA 探针

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

在合成过程中，低浓度的放射性标记的 dNTP 使探针的长度限制为 200~300 个核苷酸。但是新合成的 DNA 可通过改变投入的模板量和 dNTP 的浓度使其长度为 100~1000 个核苷酸，如此长度范围内的探针适用于大多数杂交实验。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

从M13噬菌体模板合成非固定长度的单链DNA探针

一、材料 1. 缓冲液和溶液洗脱缓冲液（1X SSPE 含 0.5% SDS）甲酰胺染色缓冲液 MgCl2 ( 1 mol/L) NaOH (10 mol/L) 3X 探针合成缓冲液（dATP、dTTP 和 dGTP ( 各 62 pmol/L），0.5 mg/ml 牛血清白蛋白（组分V，Sigma 公司），625 μmol/L DTT，32 mmol/L Tris-Cl (pH