通过PCR扩增在扩增DNA产物末端引入限制性核酸内切酶酶切位点

一、材料 1. 缓冲液与溶液 氯仿 EDTA ( 0.5 mol/L, pH 8.0) 乙醇 酚：氯仿（1:1，V/V) 乙酸钠（3 mol/L, pH 5.2) TE ( pH 7.5) 2. 酶与缓冲液 噬菌体 T4 DNA 连接酶 限制性内切核酸酶 3. 凝胶 琼脂糖凝胶 4. 核酸与寡核苷酸 正向引物（20 μmol/L）与反向引物（20 μmol/L）溶于水中