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用一步法从细胞和组织中同时制备 DNA、RNA 和蛋白质

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

同 Chomczynski 和 Sacchi 两人于 1987 年报道的 RNA 快速提取法一样,这种方法包括用含异硫氰酸胍和酚的一种单相液来裂解细胞。加入氯仿产生了第二相(有机相),DNA 和蛋白质在有机相中被抽提,RNA 则被留在上层水相中。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源:丁香实验

操作方法

用一步法从细胞和组织中同时制备DNA、RNA和蛋白质

一、材料 1. 缓冲液和溶液 氯仿 乙醇 异丙醇 液氮 单相裂解试剂 磷酸缓冲盐溶液(PBS), 冰冷 RNA 沉淀液(1.2 mol/L NaCl,0.8 mol/L 柠檬酸二钠盐·15H2O(不需要调 pH) 乙酸钠(3 mol/L, pH 5.2) 2. 细胞和组织 源细胞或组织 3. 离心机和转头 Sorvall H1000 转头或与之相当的转头 Sorva

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