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Southern印迹(DNA从一块琼脂糖凝胶上同时向两张膜转移)

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

DNA 可以同时从琼脂糖两面向两张膜上转移。当需要用两种不同的探针分析相同的限制性内切核酸酶酶切片段时,这种方法是很有用的。DNA 片段转移速率较快,但是由于凝胶中的液体从两侧同时流出导致脱水速率太快,所以转移效率较低。当靶序列的浓度较高时这种方法效率最高。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源:丁香实验

操作方法

Southern印迹(DNA从一块琼脂糖凝胶上同时向两张膜转移)

一、材料 1. 缓冲液及溶液 变性溶液(1.5 mol/L NaCl,0.5 mol/L NaOH) HCl ( 0.2 mol/L) 应用于 DNA 脱嘌呤 中和缓冲液(1 mol/L Tris ( pH 7.4),1.5 mol/L NaCl) 中性转移缓冲液(10X SSC) 6X SSC 6X 蔗糖凝胶上样缓冲液 SYBR Gold 或溴化乙锭 2. 酶及缓冲液 适当的

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