从96孔微培养板生长的哺乳动物细胞中分离 DNA

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本方案由 Ramirez-solis 等的方法 1992，1993 改进而成，是一种从微培养板的每个孔生长的真核细胞抽提基因组 DNA 的简便有效的方法。每个孔产生的基因组 DNA 足以做数次聚合酶链反应（PCR) 或者一次 Southern 杂交。对于制备用于 PCR 反应的基因组 DNA 的最佳方法。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

从96孔微培养板生长的哺乳动物细胞中分离DNA

一、材料 1. 缓冲液和溶液细胞裂解缓冲液（10 mmol/L Tris-Cl (pH 7.5)，10 mmol/L NaCl，0.5% (m/V) Sarkosyl）乙醇 NaCl/乙醇溶液磷酸盐缓冲液（PBS ) 蔗糖凝胶上样缓冲液 TE (pH 8.0) 2. 酶和缓冲液限制性内切核酸酶无 DNase 的 RNase 3. 专用设备与带阀门的真空管相连的抽