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脉冲场凝胶中浓缩 DNA 片段的回收

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

低熔点琼脂糖切片中的 DNA 首先通过电泳浓缩进入高百分比琼脂糖凝胶中,然后用琼脂糖酶处理而分离。最终 DNA 制备通过微透析纯化。这种方法在把分离的 DNA 注入小鼠受精卵(Schedl et al. 1993) 或转染鼠胚胎干细胞(Choi et al. 1993) 时是非常有效的。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源:丁香实验

操作方法

脉冲场凝胶中浓缩DNA片段的回收

一、材料 1. 缓冲液和溶液 平衡缓冲液(1X TBE,100 mmol/L NaCl,30 μmol/L 精胺,70 μmol/L 亚精胺) 溴化乙锭(1 μg/ml) 或适当稀释度的 SYBR Gold 注射/转染缓冲液(10 mmol/L Tris-Cl (pH 7.5),0.1 mmol/L EDTA,100 mmol/L NaCl,30 mmol/L 精胺,70 μmol/L 亚

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