提问
提问
我要登录
|免费注册
收藏
wx-share
分享

聚丙烯酰胺凝胶中 DNA 片段的回收(压碎与浸泡法)

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

从聚丙烯酰胺凝胶中回收 DNA 的标准方法是由 Maxam 和 Gilbert (1977) 最先介绍的“压碎与浸泡”技术。洗脱下来的 DNA 通常不含有酶抑制物及对细胞转染或微量注射有毒害的污染物。此方法所需时间长,但是工作量小。回收率少于30%~90%,视 DNA 片段大小而定。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源:丁香实验

操作方法

聚丙烯酰胺凝胶中DNA片段的回收(压碎与浸泡法)

一、材料 1. 缓冲液和溶液 丙烯酰胺凝胶洗脱缓冲液(0.5 mol/L 乙酸镁,10 mmol/L 四水乙酸镁,1 mmol/L EDTA (pH 8.0),0.1%(m/V)SDS(可选或不选)) 氯仿 乙醇 6X 凝胶载样缓冲液 酚:氯仿(1:1, V/V) 乙酸钠(3 mol/L, pH 5.2) TE (pH 8.0) 2. 凝胶 聚丙烯酰胺凝胶 适宜浓度的聚丙烯酰

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序