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琼脂糖凝胶中 DNA 的检测

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

琼脂糖凝胶中的核酸通过染色,可以在波长为 300 nm 的紫外灯下检测。介绍琼脂糖凝胶中核酸染色的两种方法:溴化乙锭(ethidium bromide, EB ) 染色法和 SYBR Gold 染色法。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源:丁香实验

操作方法

琼脂糖凝胶中DNA的检测

1. 凝胶溴化乙锭染色法 观察琼脂糖凝胶中 DNA 的最简便、最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色(Sharp et al. 1973)。溴化乙锭含有一个可以嵌入 DNA 堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与 DNA 的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每 2.5 个碱基插入一个溴化乙锭分子(Waring 1965)。当染料分子插入后,其平面基团与螺旋的轴线垂直并通

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