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电穿孔转染 DNA 实验

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

电穿孔可以有效地转染磷酸钙-DNA 沉淀物等其他方法转染效果不好的细胞系。但是,与其他转染方法一样,未使用过的细胞系进行电穿孔转染的实验条件要经过优化。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源:丁香实验

操作方法

电穿孔转染 DNA 实验

材料 缓冲液与溶液 贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录 1。 稀释贮存液至所需浓度 Giemsa 染液(10%m/V) Giemsa 染液应使用前用磷酸盐缓冲液或水新鲜制备的,用 Whatman1 号滤纸过。 甲醇 磷酸盐缓冲液 溶液使用前过滤除菌,室温保存 丁酸钠(500 mmol/L)(备选) 在化学通风橱内,用10mol/LNaOH 调节丁酸贮存液至 pH7.0。用 0.22um

盲肠结扎穿孔实验(CLP)

1.选择所需动物禁食 12 小时,称重,根据不同动物体重注射适量的戊巴比妥钠麻醉动物。2.将动物腹部朝上,固定四肢,用推毛器推去动物腹部毛发,75% 酒精棉球消毒一遍,碘伏消毒一遍,手术器械提前浸泡酒精或高压消毒。3.将动物下腹正中打开 1cm 左右切口,找出盲肠,在盲肠远端与盲肠底部中间选择合适位置(结扎位置越靠近盲肠底部脓毒症的严重程度越高)结扎。4.结扎后将针头从肠系膜向反肠系膜的方向进行盲

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