大量细菌克隆的杂交方法筛选实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

这一方法由 Hanahan 和 Meselson (1980, 1983)报道，主要用来处理由质粒 cDNA 文库转化的细菌。将转化菌的混合物或者一份扩增的 cDNA 文库直接置于不含洗涤剂的硝酸纤维素膜或尼龙膜上，复制膜用膜-膜接触的方法制备。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

大量细菌克隆的杂交方法筛选实验

一、材料 1. 培养基 (1) 含有适当抗菌素的 LB 或 SOB 琼脂板。本方案中使用 2~3 天旧板效果最好，因为旧板更容易吸收接种物中的水分。 (2) 含有适当抗菌素和 25% (V/V) 甘油的 LB 或 SOB 琼脂板。 (3) 含有氯霉素的 LB 或 SOB 琼脂板。氯霉素贮存液浓度应为 170~200 μg/ml。 2. 专用设备平头镊子（如 Millipore