用放射性标记的寡核苷酸杂交筛选定点诱变重组克隆实验

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本方案主要描述了筛选噬菌体 M13 重组克隆，而一种选择方案是筛选含噬菌粒的细菌克隆。最后也介绍了用 PCR 检测突变体的方法。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

用放射性标记的寡核苷酸杂交筛选定点诱变重组克隆实验

材料缓冲液和溶液各种贮存液，缓冲液的成分及相关试剂请参见附录1 将贮存液稀释至所需的浓度。甲酸铵（0.2mol/L) 寡核苷酸杂交溶液 6XSSC 5XDenhardt's溶液 106至107dpm/ml放射性标记的寡核苷酸寡核苷酸预杂交液 6xSSC 5xDenhardt's溶液 0.1%(m/V)SDS 6XSSC 6XSSC应在所需要的温度下顸热，请见步骤 11，12