在凸出末端上连接接头实验

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

在凸出末端上连接接头实验

一、材料1. 缓冲液和溶液ATP (10 mmol/L)，乙醇，10x 接头激酶缓冲液，苯酚：氯仿（1:1, V/V），乙酸钠（3 mol/L, pH 5.2)，TE ( pH 8.0)。2. 酶及缓冲液T4 噬菌体 DNA 连接酶，多聚核苷酸激酶，限制性内切核酸酶。3. 核酸和寡核苷酸外源或目的 DNA 片段，人工合成的寡核苷酸或接头，用 TE ( pH 8.0) 溶解，终浓度约为 400 ug