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想用AAV9感染大鼠的肾足细胞敲低或过表达某个基因,参考文献太少了,请问大家有没有做过类似的实验?注射方式和注射剂量该怎么选?

相关实验:小鼠给药造模

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w晨晨晨


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3 个回答

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

可以进行尾静脉注射,浓度一般在10x3-10x5病毒载量

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于小鱼鱼1998

有帮助

注射方式可以选择微量注射器,剂量一般参考基因注射的起始剂量

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loveliufudan

有帮助

进行AAV9感染大鼠肾足细胞的实验可以选择适当的注射方式和注射剂量。虽然参考文献可能有限,但以下是一些建议和常见的做法:

1. 注射方式:AAV9可以通过不同的注射方式送达大鼠肾脏,常见的方式包括静脉注射、腹腔注射和尾静脉注射。选择注射方式时,需要考虑AAV9在体内的分布和目标细胞的特点。例如,静脉注射可使AAV9广泛分布到全身,包括肾脏,但可能会导致非特异性表达。腹腔注射可以针对性地将AAV9引导到腹腔腺体,但需要注意分散到其他组织的风险。尾静脉注射可以在特定情况下实现针对性的注射。

2. 注射剂量:注射剂量的选择取决于目标基因的表达水平和研究目的。一般而言,较高的注射剂量可以导致更高的转染效率和表达水平,但也可能引起免疫反应。初次实验时,可以尝试不同的剂量范围,以确定适当的注射剂量。通常,注射剂量在10^10至10^13 vg(病毒基因拷贝)之间。

3. 预实验和优化:在正式实验之前,可以进行预实验和优化步骤来确定最佳的注射方式和剂量。这些实验可以包括注射不同浓度的AAV9病毒颗粒或进行时间点的优化,以评估转染效率、表达水平和安全性。

4. 合理对照组设计:为了准确评估敲低或过表达某个基因对肾足细胞的影响,需要设计合理的对照组。可以包括空载体对照组(注射AAV9载体病毒而不含目标基因)、野生型对照组(未进行注射)以及其他适当的对照组。

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