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原代乳鼠心肌成纤维细胞培养

相关实验:心肌缺血引起的心力衰竭动物模型

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z朵朵

SD原代乳鼠心肌成纤维细胞,酶消化法分离。后续用TGFb1刺激诱导纤维化。但是细胞活化非常快。对照组纤维化指标也很高。请问各位大神,细胞培养血清浓度都是多少?如果避免活化?

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4 个回答

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dxy_ufp8rsp0

有帮助

你好,楼主,想请教一些关于提原代心肌成纤维细胞的问题,方便解答一下吗?

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loveliufudan

有帮助

以下是一些建议:

1. 血清浓度:血清在细胞培养中提供营养物质和生长因子,但其中的成分可能会对细胞活化和纤维化产生影响。一般来说,对于心肌成纤维细胞的培养,常用的血清浓度为10-15%。然而,较高的血清浓度可能会增加细胞活化的风险。您可以尝试降低血清浓度,如5%或更低,以减少细胞的非特异性激活。

2. 血清来源:不同批次的血清可能存在差异,可能会对细胞活化产生影响。建议使用相同来源和批次的血清来提高实验的可重复性和一致性。

3. 培养基成分:培养基中的其他成分也可能对细胞活化和纤维化产生影响。确保使用适当的培养基,其中包含适当的盐、糖、氨基酸和生长因子,以满足细胞的营养需求。

4. 细胞密度控制:将细胞密度控制在适当水平也很重要。过高的细胞密度可能会增加细胞间的相互作用和信号传递,从而促进细胞活化和纤维化。尝试调整细胞的种植密度,确保细胞能够适当地扩张和生长。

5. TGF-β1浓度和处理时间:TGF-β1是诱导纤维化的重要因子,但过高的浓度和长时间的处理可能导致非特异性的活化。尝试使用较低浓度的TGF-β1,并控制处理时间,以减少细胞活化的可能性。

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z朵朵user-title

非常感谢分享,很有帮助。

但是有个比较纠结的点就是,比如要做敲低转染,细胞密度如果过低,细胞状态会受影响。必须保证百分之八十左右的密度,这样处理的话对照组也会有影响。


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huarenqiang5

有帮助

原代乳鼠心肌成纤维细胞培养血清浓度不宜过高,以6-10%为宜。

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z朵朵user-title

嗯,我用2%的血清。但是感觉纤维化指标也是不稳定,给TGFb和对照组的差异并不是很明显。

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土井挞克树

有帮助

我们培养心肌成纤维细胞一般使用10%胎牛血清,效果不错

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z朵朵user-title

请问后续是做纤维化表型吗?这么高的血清对照组的指标有影响吗?

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