蹲个大佬
SD大鼠睾丸支持细胞原代提取用的两步酶消化法,用胰酶消化完是不是要离心弃掉胰酶,在加FBS终止消化,还是静置就可以。消化完上清里的组织是一起倒掉嘛😭😭再就是这个细胞有没有大佬分享一下培养心得😭😭拜托了,孩子真的很需要。
汤姆卜丽波
消化完加一点培养基再离心弃掉。然后上清组织不要,直接加血清
蹲个大佬
求问,感觉离心下去的沉淀一碰就动了,会随着弃上清特别容易就走了,像是组织的粘稠感觉,这种是不是也应该直接弃掉,属于组织呀
loveliufudan
在使用两步酶消化法提取睾丸支持细胞的过程中,消化完胰酶后,一般需要离心沉淀并弃掉胰酶,避免其影响后续的细胞培养。然后再加入FBS停止消化,并通过过滤器过滤掉组织碎片等杂质。上清里的细胞可以一起倒掉,收集下来的细胞沉淀进行细胞培养。
对于SD大鼠睾丸支持细胞的培养,一般需要使用DMEM或DMEM/F12培养基,加入10%胎牛血清或FBS等生长因子和抗生素抗菌素,可以在37°C、5% CO2条件下进行培养。细胞定期观察,更换培养基,控制细胞密度,保持培养条件的稳定性和一致性。同时,还需要注意细胞的无菌处理,避免细菌和真菌的污染。
蹲个大佬
求问,感觉离心下去的沉淀一碰就动了,会随着弃上清特别容易就走了,像是组织的粘稠感觉,这种是不是也应该直接弃掉,属于组织呀
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