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因为细胞膜对水是自由扩散,在低浓度溶液中外压小于内压。细胞可以无限吸水,之后细胞中水分过多,从而细胞吸水涨破。低渗液的量、处理时间均与细胞的数量有关。低渗过度,细胞会破裂;低渗不足则染色体在一起,分散不开。低渗处理不好。低渗液的量、处理时间均与细胞的数量有关,所以要控制好这些情况。
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你好,不同条件,代谢活化组和非代谢活化组,非代谢活化组就很容易胀破,我们非代谢活化组用的是0.02M的磷酸盐缓冲液,代谢活化组用的是s9,跟细胞收集时候的吹打力度有关系吗?
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注意事项:
1、培养温度应严格控制在37±0.5℃,培养液最适合 pH 为7.2—7.4。
2、秋水仙素处理时间过长,分裂细胞多,染色体短小;反之,则少而细长。都不宜观察形态及计数。故秋水仙素的浓度及时间要准确掌握。
3、低渗使红细胞膜破裂,淋巴细胞膨胀,低渗处理浓度及时间要适当。且低渗后混匀细胞一定要轻,否则引起膜破裂、染色体散失。
4、离心前配平,离心速度过高,细胞团不易打散;反之,细胞易丢失。
5、固定液应在使用前临时配制。
6、载玻片一定要洁净,否则染色体分散不好。
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在染色体畸变制片低渗的过程中,细胞破裂可能会导致染色体裂解和聚集,影响到制片的质量。为了减少这种情况的发生,可以考虑以下几个注意事项:
选择适当的细胞数量。在低渗前,需要检查细胞的密度和健康状况,避免过多或过少的细胞。过多的细胞容易导致过度压缩,而过少的细胞可能导致细胞断裂时破损度增加。
选择适当的渗透压。低渗液的渗透压应与细胞内渗透压接近,以减少细胞破裂的风险。如果渗透压过高,会导致细胞内水分大量移出,细胞膜破裂;如果渗透压过低,会导致细胞内水分大量进入,细胞膜破裂。
控制低渗时间。低渗时间过短会导致细胞膜无法完全裂解,而过长会导致细胞内容物外溢或破碎。在低渗过程中需要仔细观察细胞的状态,并根据实际情况调整低渗时间。
注意低渗液的pH值。低渗液的pH值应适中,不宜过高或过低。过高或过低的pH值可能会导致细胞膜破裂或细胞内容物失活。
如果细胞在低渗过程中破裂,可以考虑重新进行低渗制片。如果问题仍然存在,可以尝试调整低渗液的成分、温度和时间等条件,以优化低渗过程。
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缓慢更改渗透压,可以有效防止低渗破裂