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金葡PFGE一直跑不出来

相关实验:金黄色葡萄球菌感染动物模型

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tecca199

求大神来助 为什么我一跑金葡就这样阿 条带老是降解 看不清楚 ,跑了一个月都没有跑出个好结果 优化了很多步骤还是做不出来 。阴性菌做的都还行 为什么一做阳性金葡就会这样呢

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1 个回答

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土井挞克树

有帮助

条带降解可能是

造成的原因是因为Tris缓冲液当中含义盐酸的成分被氧化,使得溶液从碱性变为酸性,二某些菌体本身在酸性的环境中容易被降解,造成我们在pfge条带图当中看不到相应的酶切位点。

如要改善这个情况,需要加入适量的硫脲到0.5X TBE中,然后在进行电泳。因为硫脲是一种还原剂,可以中和氧化物质,从而改善条带分型或一片模糊的现象

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