小啊鱼777
我是个新手,做了两次EAE模型都不成功,有没有模型成功的前辈啊,能否指导指导我😂😂
暂时想不出好名字
你后来成功了没有啊😂能不能请教下你🥹
土井挞克树
自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型
一、实验材料
MOG35-55(吉尔生物,51716)
CFA(sigma,F5881)
百日咳素(sigma,P7208)
二、实验方法
1、抗原乳化:1mg/ml的CFA和1mg/ml的MOG35-55混合乳化,利用三通管排出注射器中的空气,冰上来回交替推动活塞 30 min,抗原呈完全乳化状态。
(也可使用高速搅拌器,4℃搅拌2min,3-5次)
2、完全乳化的抗原使用1 ml注射器分装,排除内空气后保存于冰上。
3、百日咳素(PTX)的稀释:用 1×PBS以 1:25稀释 PTX至终浓度2ug/ml。
4、小鼠尾静脉(i.v.)注射PTX,100ul/只小鼠 。
5、小鼠气麻后,用酒精棉球消毒小鼠前肢肩胛骨与后扇部位的皮肤,皮下注射 MOG35-55抗原乳化液于该四点处,每处 50μl。
7、48 h后,每只小鼠再次尾静脉注射 100 μl PTX。
8、模型诱导首天记为Day 0,每天统计小鼠体重,观察评分 。