流失检测中多marker时荧光抗体的选择及补偿调节，真的要被补偿整懵了，看了很多原理都懂，但是实际操作还是磕磕绊绊

没事，慢慢来，我之前刚做的时候也不太懂，对于荧光补偿的确定，需运用以上补偿的基本原理并结合特定的标本来实现。以FITC,PE双色分析为例：（1）先调节阴性对照管：将原补偿清零，首先调节电压，通过调节电压，使阴性群落在FITC和PE双阴性区。（2）FITC单染管：在理想情况下（没有荧光干扰），因检测管中不应该出现PE信号，但实际情况是在FITC与PE的双阳性区出现了荧光信号。这个信号就是PE探测器检测到的FITC信号。此时需要通过调节补偿参数，取合适的补偿强度来抵消PE中的信号。如下图所示，调节补偿（PE- %FITC ),使得两群细胞FL2的Mean/Median值相同或相近，或通过经验判断（原则为“横平，竖直”）。当PE探测器检测到的FITC信号恰好完全消除时，即PE信号与阴性对照一样时，PE对FITC的补偿调节完成。（3）PE单染管：同理，将进入FITC探测器的PE信号通过补偿调节来消除。 （4）当设置好以上补偿条件后，即补偿调节完毕。