请问如果用4%多聚甲醛溶液代替70%酒精对细胞进行固定的话，需要单独做细胞膜透过处理吗？

当然需要，一般先做细胞膜透过处理然后用4%多聚甲醛固定

如果你打算使用4%多聚甲醛（PFA）代替70%酒精进行细胞固定，通常不需要单独进行细胞膜透过处理。PFA是一种常用的细胞固定剂，可用于保持细胞的形态结构和固定细胞内的分子。

在使用PFA进行细胞固定时，通常遵循以下步骤：

1. 准备PFA溶液：制备4% PFA溶液，通常是将PFA固体加入缓冲液（如PBS）中，并在适当温度下搅拌溶解。

2. 固定细胞：将细胞与4% PFA溶液接触一段时间（通常是15-30分钟），可以在室温或4°C下进行。

3. 洗涤：洗涤细胞，以去除多余的PFA。常规的洗涤步骤是使用PBS或缓冲液进行重复洗涤。

4. 后续实验：根据你的需要，可以进行各种后续实验，如免疫染色、细胞培养等。

相比于酒精固定，PFA固定通常能够更好地保持细胞的形态和分子结构。然而，不同细胞类型对固定剂的敏感性可能会有所不同。在使用PFA固定细胞之前，建议查阅相关文献或咨询实验室的导师或同事，以了解你所研究的特定细胞类型对PFA固定的适应性。

是需要单独做细胞膜透过处理的。

需要的，细胞膜相关组分抗原一般以多聚甲醛固定。细胞器和细胞颗粒内的抗原一般也用多聚甲醛固定，并需要进行通透以使抗体能达到抗原表位。通透步骤只在检测细胞内抗原表位的时候才需要,因为抗体需要进入细胞内部去检测蛋白。但是,如果待检测的是跨膜蛋白,且其抗原表位处于胞质内区域,则同样需要对细胞进行通透。相反,如果所检测的抗原表位位于膜蛋白的胞外段,则不需要进行通透。丙酮本身具有通透作用,因此用丙酮作为固定剂时是不需要通透的，但多聚甲醛需要。